技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及多糖特別是透明質(zhì)酸或其鹽的噴霧干燥。
背景技術(shù)

[0002] 透明質(zhì)酸（HA）是一種天然的線性碳水化合物聚合物，屬于非硫酸化糖胺聚糖類。其由β-1,3-N-乙酰葡糖胺和β-1,4-葡糖醛酸重復(fù)二糖單元組成，分子量（MW）達(dá)10MDa。

申請(qǐng)日：2012-05-29
申請(qǐng)人： 諾維信生物制藥丹麥公司
發(fā)明人 ： K.特梅拉斯 , P.巴赫
IPC分類號(hào)： C08B37/00 , B01D1/18 , C08L5/08
CPC分類號(hào)： A61K31/728 , C08B37/0072 , C08L5/08

HA見于透明軟骨、滑膜關(guān)節(jié)液和皮膚組織包括表皮和真皮層。
[0003] HA可提取自天然組織，包括脊椎動(dòng)物的結(jié)締組織、人臍帶和雞冠。然而，現(xiàn)今優(yōu)選通過微生物方法制備透明質(zhì)酸，從而使傳播傳染性病原體的潛在風(fēng)險(xiǎn)最小化，并提升產(chǎn)品一致性、質(zhì)量和可得性（US6,951,743）。
[0004] 已鑒定HA在人體中的多種作用。它在生物有機(jī)體中發(fā)揮著重要作用，作為很多組織（如皮膚、腱、肌肉和軟骨）的細(xì)胞的機(jī)械支撐。HA參與關(guān)鍵生物過程，如組織潤燥（moistening of tissue）以及潤滑。還猜測(cè)它在眾多生理功能如粘附、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、癌癥、血管發(fā)生和傷口愈合中發(fā)揮作用。
[0005] 由于HA獨(dú)特的物理和生物性質(zhì)（包括粘彈性、生物相容性和生物可降解性），HA在大范圍的化妝品、眼科學(xué)、風(fēng)濕病學(xué)、藥物和基因傳遞、傷口愈合和組織工程學(xué)的當(dāng)前和開發(fā)應(yīng)用中得以采用。
[0006] WO05/116531描述了一種噴霧干燥透明質(zhì)酸的方法（分子量為800kDa-參見實(shí)施例6）。
[0007] 在對(duì)分子量比約1200kDa更高的透明質(zhì)酸進(jìn)行噴霧干燥時(shí)，可能出現(xiàn)明顯的分子量損失。
發(fā)明內(nèi)容
[0008] 本發(fā)明涉及對(duì)高分子量透明質(zhì)酸進(jìn)行噴霧干燥的方法。該方法包括：
[0009] a）將透明質(zhì)酸噴霧干燥，其中噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的濃度在3.5g/l至7.0g/l的范圍內(nèi)；
[0010] b）使噴霧干燥器進(jìn)料的溫度在0℃至100℃的范圍內(nèi)；且，
[0011] 其中噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量≥1200kDa。
[0012] 本發(fā)明的方法降低了經(jīng)噴霧干燥的透明質(zhì)酸產(chǎn)品的分子量損失。
具體實(shí)施方式
[0013] 本發(fā)明涉及對(duì)高分子量透明質(zhì)酸進(jìn)行噴霧干燥的方法。
[0014] 透明質(zhì)酸
[0015] “透明質(zhì)酸”是一種多糖，在本文中定義為由N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）及葡糖醛酸（GlcUA）的重復(fù)二糖單元組成的非硫酸化糖胺聚糖，其通過交替的β-1,4和β-1,3糖苷鍵連接在一起。透明質(zhì)酸也被稱作透明質(zhì)烷（hyaluronan）、透明質(zhì)酸鹽（hyaluronate）或HA。術(shù)語透明質(zhì)烷和透明質(zhì)酸在本文中可以互換使用。
[0016] 雞冠是透明質(zhì)烷的重要商業(yè)來源。微生物是另外可選的來源。美國專利第4,801,539號(hào)公開了一種制備透明質(zhì)酸的發(fā)酵方法，其包含獸疫鏈球菌（Streptococcus zooepidemicus）的菌株。WO03/054163公開了一種制備透明質(zhì)酸的發(fā)酵方法，其包含芽孢桿菌（Bacillus）宿主。
[0017] 透明質(zhì)烷合酶被描述為來自脊椎動(dòng)物、細(xì)菌病原體和藻類病毒（DeAngelis,P.L.,1999,Cell.Mol.Life Sci.56:670-682）。WO99/23227公 開 了 來 自 似 馬 鏈 球 菌（Streptococcus equisimilis）的I組透明質(zhì)酸鹽合酶。WO99/51265和WO00/27437描述了來自多殺性巴氏桿菌（Pasturella multocida）的II組透明質(zhì)酸鹽合酶。Ferretti等人公開了釀膿鏈球菌（Streptococcus pyogenes）的透明質(zhì)烷合酶操縱子，其由三個(gè)基因hasA、hasB和hasC組成，分別編碼透明質(zhì)酸鹽合酶、UDP葡萄糖脫氫酶和UDP葡萄糖焦磷酸化酶，（Proc.Natl.Acad.Sci.USA.98,4658-4663,2001）。WO99/51265描述了具有似馬鏈球菌透明質(zhì)烷合酶的編碼區(qū)的核酸片段。
[0018] 由于重組芽孢桿菌細(xì)胞的透明質(zhì)烷直接表達(dá)至培養(yǎng)基中，可使用簡單的方法從培養(yǎng)基中分離透明質(zhì)烷。首先，從培養(yǎng)基中物理去除芽孢桿菌細(xì)胞和細(xì)胞碎片。如果期望，首先可將培養(yǎng)基稀釋，以降低培養(yǎng)基的粘性。用于從培養(yǎng)基去除細(xì)胞的許多方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是已知的，例如離心和微濾（microfiltration）。如果期望，然后可將剩余的上清液過濾，例如通過超濾，以濃縮透明質(zhì)烷并從中去除小分子污染物。去除細(xì)胞和細(xì)胞碎片之后，通過已知機(jī)制從培養(yǎng)基簡單沉淀透明質(zhì)烷。鹽、醇或鹽和醇的組合可用于從濾液沉淀透明質(zhì)烷。
[0019] 可以通過使用例如本發(fā)明的噴霧干燥法從任何溶液干燥透明質(zhì)烷，例如從濾液或從再溶解的溶液中干燥透明質(zhì)烷。
[0020] 宿主細(xì)胞
[0021] 優(yōu)選的實(shí)施方式涉及第一方面的產(chǎn)品，其中以重組方式生產(chǎn)透明質(zhì)酸或其鹽，優(yōu)選通過革蘭氏陽性細(xì)菌或宿主細(xì)胞生產(chǎn)，更優(yōu)選通過芽孢桿菌屬的細(xì)菌生產(chǎn)。
[0022] 宿主細(xì)胞可以是任何適合于透明質(zhì)酸重組生產(chǎn)的芽孢桿菌細(xì)胞。芽孢桿菌宿主細(xì)胞可以是野生型芽孢桿菌細(xì)胞或其突變體?？稍诒景l(fā)明的實(shí)踐中使用的芽孢桿菌細(xì)胞包括但不限于，Bacillus agaraderhens、嗜堿芽孢桿菌（Bacillus alkalophilus）、解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）、短芽孢桿菌（Bacillus brevis）、環(huán)狀芽胞桿菌（Bacillus circulans）、克勞氏芽孢桿菌（Bacillus clausii）、凝結(jié)芽孢桿菌（Bacillus coagulans）、堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌（Bacillus firmus）、燦爛芽胞桿菌（Bacillus lautus）、遲緩芽孢桿菌（Bacillus lentus）、地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）、巨大芽胞桿菌（Bacillus megaterium）、短小芽孢桿菌（Bacillus pumilus）、嗜熱脂肪芽孢桿菌（Bacillus stearothermophilus）、枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）和蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis）細(xì)胞。WO98/22598中記載了特別適于重組表達(dá)的突變枯草芽孢桿菌細(xì)胞。無被囊的（non-encapsulating）芽孢桿菌屬細(xì)胞在本發(fā)明中是特別有用的。
[0023] 在優(yōu)選實(shí)施方式中，芽孢桿菌屬宿主細(xì)胞是解淀粉芽孢桿菌、克勞氏芽孢桿菌、遲緩芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、嗜熱脂肪芽孢桿菌或枯草芽孢桿菌細(xì)胞。
[0024] 生產(chǎn)
[0025] 在本發(fā)明的方法中，使用本領(lǐng)域已知的方法在適合于生產(chǎn)透明質(zhì)酸的營養(yǎng)培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞（如鏈球菌屬）或宿主細(xì)胞（如芽孢桿菌屬）。
[0026] 例如，可在實(shí)驗(yàn)室或工業(yè)發(fā)酵罐中通過搖瓶培養(yǎng)、小規(guī)模或大規(guī)模發(fā)酵（包括連續(xù)發(fā)酵、分批發(fā)酵、分批補(bǔ)料發(fā)酵或固態(tài)發(fā)酵）來培養(yǎng)細(xì)胞。
[0027] 使用本領(lǐng)域已知的步驟在包含碳源、氮源和無機(jī)鹽的合適營養(yǎng)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。合適的培養(yǎng)基可以從商業(yè)供應(yīng)商獲得，或可以根據(jù)已公開的組成（例如，在美國典型培養(yǎng)物保藏中心的目錄中）制備。
[0028] 可以按本領(lǐng)域已知的，例如使用改進(jìn)的咔唑方法（Bitter and Muir,1962,Anal Biochem.4:330-334），來測(cè)定透明質(zhì)酸的水平。
[0029] 分子量
[0030] 可以按本領(lǐng)域已知的來測(cè)定透明質(zhì)酸的平均分子量。
[0031] 特別地，可以使用本領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定透明質(zhì)酸的平均分子量，例如由Ueno等 ,1988,Chem.Pharm.Bull.36,4971-4975;Wyatt,1993,Anal.Chim.Acta272:1-40； 和Wyatt Technologies,1999,“Light Scattering University DAWN Course Manual”和“DAWN EOS Manual”Wyatt Technology Corporation,Santa Barbara,California所描述的那些方法。
[0032] 透明質(zhì)酸的分子量測(cè)定也可采用GPC-RI-LS進(jìn)行，其中透明質(zhì)酸的分子量測(cè)定采用GPC聯(lián)用示差RI和多角度光散射檢測(cè)器進(jìn)行。
[0033] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量為至少1200kDa；特別地，噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至10,000kDa的范圍內(nèi)；優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至9,500kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至9,000kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至8,500kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至8,000kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至7,500kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在
1200kDa至7,000kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至6,500kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至
6,000kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至5,500kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至5,000kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至4,500kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至4,000kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至3,500kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至3,000kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至2,900kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至2,800kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在
1200kDa至2,700kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至2,600kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至
2,500kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至2,400kDa的范圍內(nèi)；更優(yōu)選噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至2,300kDa的范圍內(nèi)；特別地，噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的分子量在1200kDa至2,200kDa的范圍內(nèi)。
[0034] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，噴霧干燥過程中透明質(zhì)酸的分子量損失低于15%；例如，噴霧干燥過程中透明質(zhì)酸的分子量損失低于14%；噴霧干燥過程中透明質(zhì)酸的分子量損失低于13%；噴霧干燥過程中透明質(zhì)酸的分子量損失低于12%；噴霧干燥過程中透明質(zhì)酸的分子量損失低于11%；噴霧干燥過程中透明質(zhì)酸的分子量損失低于10%；噴霧干燥過程中透明質(zhì)酸的分子量損失低于9%；噴霧干燥過程中透明質(zhì)酸的分子量損失低于8%；噴霧干燥過程中透明質(zhì)酸的分子量損失低于7%；噴霧干燥過程中透明質(zhì)酸的分子量損失低于6%；特別地，噴霧干燥過程中透明質(zhì)酸的分子量損失低于5%。
[0035] HA鹽
[0036] 優(yōu)選的實(shí)施方式涉及包括透明質(zhì)酸的鹽的產(chǎn)品；特別是包含透明質(zhì)酸的無機(jī)鹽的產(chǎn)品；優(yōu)選包括透明質(zhì)酸鈉、透明質(zhì)酸鉀、透明質(zhì)酸銨、透明質(zhì)酸鈣、透明質(zhì)酸鎂、透明質(zhì)酸鋅或透明質(zhì)酸鈷的產(chǎn)品。
[0037] 衍生化的HA
[0038] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)行噴霧干燥的透明質(zhì)酸可以如本領(lǐng)域已知的進(jìn)行衍生化或修飾。
[0039] HA可以以多種不同方式進(jìn)行衍生化或修飾，例如，如在WO2007/033677中所描述的，其中透明質(zhì)酸（HA）可與芳基或烷基琥珀酸酐（ASA）反應(yīng)，產(chǎn)生包括n個(gè)重復(fù)單元且在pH8-9下具有結(jié)構(gòu)通式（I）的芳基/烷基琥珀酸酐HA衍生物：
[0040]
[0041] 其中在至少一個(gè)重復(fù)單元中，R1、R2、R3、R4中的一個(gè)或多個(gè)包括在pH8-9下具有結(jié)構(gòu)通式（II）的酯鍵合的烷基/芳基琥珀酸，否則R1、R2、R3、R4為羥基OH：
[0042]
[0043] 其中R5、R6、R7、R8中的至少一個(gè)包括烷基或芳基，否則R5、R6、R7、R8是氫原子H，其中標(biāo)記“酯”的氧參與與結(jié)構(gòu)（I）形成的酯鍵。
[0044] 可以如WO2007/106738中所記載的對(duì)HA進(jìn)行衍生化或修飾，其中按以下方式制備丙烯酸酯化（acrylated）的透明質(zhì)酸：
[0045] （a）制備包含透明質(zhì)酸的pH為7～11的水性液體；
[0046] （b）制備包含丙烯酰氯和二氯甲烷/乙醚的有機(jī)液；和
[0047] （c）將（b）的有機(jī)液與（a）的水性液體混合，其中pH維持在7～11。
[0048] 丙烯酸酯化的透明質(zhì)酸產(chǎn)物具有以下結(jié)構(gòu)：
[0049]
[0050] 其中R1選自氫、甲基、氯和COCl，R2選自氫、甲基、苯基、氯、2-氯苯基、COCl和CH2COCl，R3選自氫、甲基、氯、4-硝基苯基、3-三氟甲基苯基和苯乙烯基部分。
[0051] 噴霧干燥器進(jìn)料
[0052] 噴霧干燥器進(jìn)料中的透明質(zhì)酸的濃度應(yīng)在3.5g/l～7.0g/l的范圍內(nèi)；例如，在3.6g/l～7.0g/l的范圍內(nèi)；在3.7g/l～7.0g/l的范圍內(nèi)；在3.8g/l～7.0g/l的范圍內(nèi)；在3.9g/l～7.0g/l的范圍內(nèi)；在4.0g/l～7.0g/l的范圍內(nèi)；在4.0g/l～6.9g/l的范圍內(nèi)；在4.0g/l～6.8g/l的范圍內(nèi)；在4.0g/l～6.7g/l的范圍內(nèi)；在4.0g/l～6.6g/l的范圍內(nèi)；在4.0g/l～6.5g/l的范圍內(nèi)；在4.0g/l～6.4g/l的范圍內(nèi)；在4.0g/l～
6.3g/l的范圍內(nèi)；在4.0g/l～6.2g/l的范圍內(nèi)；在4.0g/l～6.1g/l的范圍內(nèi)；特別地，在4.0g/l～6.0g/l的范圍內(nèi)。
[0053] 其他成分
[0054] 在根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，包含透明質(zhì)酸的進(jìn)料還可包含其他成分，例如活性成分和/或賦形劑。
[0055] 可用于本發(fā)明的活性成分或藥理學(xué)活性物質(zhì)的非限制性實(shí)例包括蛋白質(zhì)和/或肽藥物。
[0056] 蛋白質(zhì)和/或肽藥物的實(shí)例為，人生長激素、牛生長激素、豬生長激素、生長激素釋放激素/肽、粒細(xì)胞-集落刺激因子、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞-集落刺激因子、巨噬細(xì)胞-集落刺激因子、紅細(xì)胞生成素、骨形態(tài)發(fā)生蛋白、干擾素或其衍生物、胰島素或其衍生物、心房肽激素III（atriopeptin-III）、單克隆抗體、腫瘤壞死因子、巨噬細(xì)胞活化因子、白介素、腫瘤變性因子（tumor degenerating factor）、胰島素樣生長因子、表皮生長因子、組織纖溶酶原激活物、因子IIV、因子IIIV和尿激酶。
[0057] 根據(jù)本發(fā)明可以例如出于穩(wěn)定活性成分的目的包括賦形劑，這些賦形劑可包括蛋白質(zhì)，例如白蛋白或明膠；氨基酸，如甘氨酸、丙氨酸、谷氨酸、精氨酸、賴氨酸及其鹽；碳水化合物如葡萄糖、乳糖、木糖、半乳糖、果糖、麥芽糖、蔗糖、葡聚糖、甘露醇、山梨糖醇、海藻糖和硫酸軟骨素；無機(jī)鹽如磷酸鹽；表面活性劑如 （ICI）、聚乙二醇及其混合物。
[0058] 噴霧干燥
[0059] 噴霧干燥涉及將液體進(jìn)料霧化成液滴噴霧以及在干燥室中使液滴與熱空氣接觸。通過旋轉(zhuǎn)（輪）霧化器或噴嘴霧化器產(chǎn)生噴霧。
[0060] 根據(jù)霧化原理，液滴大小通常在10～100微米的范圍內(nèi)。有兩種主要類型的噴嘴：高壓單流體噴嘴（50～500巴）和雙流體噴嘴：第一流體是要干燥的液體，第二流體是壓縮氣體（一般是2～7巴的空氣）。
[0061] 從液滴蒸發(fā)水分并形成干燥顆粒在受控的溫度和氣流條件下進(jìn)行。粉末不斷從干燥室排出。根據(jù)目標(biāo)產(chǎn)品的干燥特性來選擇操作條件。
[0062] 根據(jù)本發(fā)明，可以使用本領(lǐng)域已知的任何噴霧干燥器，但在本方法的一個(gè)實(shí)施方式中，使用雙流體噴嘴（TFN）或旋轉(zhuǎn)式霧化器進(jìn)行噴霧干燥步驟。
[0063] 可使用100℃至200℃的進(jìn)口溫度進(jìn)行噴霧干燥；優(yōu)選120℃至200℃的進(jìn)口溫度；特別是140℃至200℃的進(jìn)口溫度。
[0064] 可使用40℃至95℃的出口溫度進(jìn)行噴霧干燥；優(yōu)選50℃至94℃的出口溫度；優(yōu)選60℃至94℃的出口溫度；特別是70℃至93℃的出口溫度。
[0065] 可使用0℃至100℃的進(jìn)料溫度進(jìn)行噴霧干燥；例如1℃至100℃的進(jìn)料溫度；2℃至100℃的進(jìn)料溫度；3℃至100℃的進(jìn)料溫度；4℃至100℃的進(jìn)料溫度；5℃至100℃的進(jìn)料溫度；6℃至100℃的進(jìn)料溫度；7℃至100℃的進(jìn)料溫度；8℃至100℃的進(jìn)料溫度；9℃至100℃的進(jìn)料溫度；10℃至100℃的進(jìn)料溫度；11℃至100℃的進(jìn)料溫度；12℃至100℃的進(jìn)料溫度；13℃至100℃的進(jìn)料溫度；14℃至100℃的進(jìn)料溫度；15℃至100℃的進(jìn)料溫度；16℃至100℃的進(jìn)料溫度；17℃至100℃的進(jìn)料溫度；18℃至100℃的進(jìn)料溫度；19℃至100℃的進(jìn)料溫度；20℃至100℃的進(jìn)料溫度；21℃至100℃的進(jìn)料溫度；22℃至100℃的進(jìn)料溫度；23℃至100℃的進(jìn)料溫度；24℃至100℃的進(jìn)料溫度；25℃至100℃的進(jìn)料溫度；26℃至100℃的進(jìn)料溫度；27℃至100℃的進(jìn)料溫度；28℃至100℃的進(jìn)料溫度；29℃至100℃的進(jìn)料溫度；30℃至100℃的進(jìn)料溫度；31℃至100℃的進(jìn)料溫度；32℃至100℃的進(jìn)料溫度；33℃至100℃的進(jìn)料溫度；34℃至100℃的進(jìn)料溫度；35℃至100℃的進(jìn)料溫度；36℃至100℃的進(jìn)料溫度；37℃至100℃的進(jìn)料溫度；38℃至100℃的進(jìn)料溫度；39℃至100℃的進(jìn)料溫度；40℃至100℃的進(jìn)料溫度；41℃至100℃的進(jìn)料溫度；42℃至100℃的進(jìn)料溫度；43℃至100℃的進(jìn)料溫度；44℃至100℃的進(jìn)料溫度；45℃至100℃的進(jìn)料溫度；46℃至100℃的進(jìn)料溫度；47℃至100℃的進(jìn)料溫度；48℃至100℃的進(jìn)料溫度；49℃至100℃的進(jìn)料溫度；50℃至100℃的進(jìn)料溫度；51℃至100℃的進(jìn)料溫度；52℃至100℃的進(jìn)料溫度；53℃至100℃的進(jìn)料溫度；54℃至100℃的進(jìn)料溫度；55℃至100℃的進(jìn)料溫度；56℃至100℃的進(jìn)料溫度；57℃至100℃的進(jìn)料溫度；58℃至100℃的進(jìn)料溫度；59℃至100℃的進(jìn)料溫度；60℃至100℃的進(jìn)料溫度；61℃至100℃的進(jìn)料溫度；62℃至100℃的進(jìn)料溫度；63℃至100℃的進(jìn)料溫度；64℃至100℃的進(jìn)料溫度；65℃至100℃的進(jìn)料溫度；66℃至100℃的進(jìn)料溫度；67℃至100℃的進(jìn)料溫度；68℃至100℃的進(jìn)料溫度；69℃至100℃的進(jìn)料溫度；70℃至100℃的進(jìn)料溫度；特別是70℃至99℃的進(jìn)料溫度。
[0066] 噴嘴空氣溫度通常會(huì)在10℃至100℃；特別是在20℃至90℃。
[0067] 旋轉(zhuǎn)式霧化器的圓周速度通常會(huì)在50m/s至250m/s。
[0068] 根據(jù)本發(fā)明，可便利地通過噴霧干燥先產(chǎn)生干燥細(xì)粉。然后可在流化床和液體粘合劑中將所述細(xì)粉液化，例如將水噴到設(shè)備上形成附聚物。
[0069] 實(shí)施例
[0070] 實(shí)施例1
[0071] 使用進(jìn)料中透明質(zhì)酸（HA）濃度、進(jìn)料溫度及霧化原理的不同組合進(jìn)行噴霧干燥。
[0072] 以HA濃度、進(jìn)料溫度和霧化原理（外部TFN或旋轉(zhuǎn)式霧化器）的不同組合在小中試規(guī)模噴霧干燥器（Minor pilot scale spray dryer，MM）中來運(yùn)行HA。所有實(shí)驗(yàn)均在GEA移動(dòng)型小中試規(guī)模噴霧干燥器（MM）上進(jìn)行。
[0073] 測(cè)量以下參數(shù)：送至噴霧干燥器的進(jìn)料中的HA分子量（MW），產(chǎn)品中的HA分子量以及粒徑分布（PSD）。
[0074] 所有實(shí)驗(yàn)均以195℃的干燥室進(jìn)口溫度（Tin）、85℃的出口溫度（Tout）和約80kg/h的干燥氣流進(jìn)行。
[0075] 表1總結(jié)了霧化原理為旋轉(zhuǎn)噴霧的結(jié)果，表2總結(jié)了霧化原理為TFN的結(jié)果。
[0076] 表1.
[0077]
[0078] 表2.
[0079]
[0080] 產(chǎn)品無一表現(xiàn)出任何變色。
[0081] 對(duì)表1和表2結(jié)果的統(tǒng)計(jì)分析表明，使用較高的進(jìn)料HA濃度使噴霧干燥過程中的分子量損失明顯降低。
[0082] 實(shí)施例2
[0083] 對(duì)不同分子量的透明質(zhì)酸進(jìn)行噴霧干燥
[0084] 在裝備有外部雙流體噴嘴（TFN）的中試規(guī)模流化噴霧干燥器（FSD）上對(duì)不同批次的具有不同HA分子量（MW）和濃度的透明質(zhì)酸（HA）的進(jìn)料進(jìn)行噴霧干燥。
[0085] 表3概述了進(jìn)料濃度、HA分子量和干燥產(chǎn)品的HA分子量。
[0086] 所有批次以195℃的干燥室進(jìn)口溫度、89℃的空氣出口溫度和95℃的進(jìn)料溫度進(jìn)行噴霧干燥。
[0087] 產(chǎn)品無一表現(xiàn)出任何變色。
[0088] 表3.
[0089]
[0090] 實(shí)施例3
[0091] 使用進(jìn)料中透明質(zhì)酸（HA）濃度、進(jìn)料溫度及霧化原理的不同組合進(jìn)行噴霧干燥。
[0092] 以HA濃度、進(jìn)料溫度和霧化原理（外部TFN或旋轉(zhuǎn)式霧化器）的不同組合在小中試規(guī)模噴霧干燥器中來運(yùn)行HA。所有實(shí)驗(yàn)均在GEA移動(dòng)型小中試規(guī)模噴霧干燥器（MM）上進(jìn)行。
[0093] 測(cè)量以下參數(shù)：進(jìn)料中的HA分子量（MW），產(chǎn)品中的HA分子量以及粒徑分布（PSD）。
[0094] 所有實(shí)驗(yàn)均以195℃的干燥室進(jìn)口溫度（Tin）、90℃的出口溫度（Tout）和約80kg/h的干燥氣流進(jìn)行。
[0095] 表4總結(jié)了該結(jié)果：